提取豌豆蚜CHC提取方法，昆虫表皮碳氢化合物（Cuticular hydrocarbon）
2023/9/6 14:49:02 点击：
豌豆蚜CHC提取方法，昆虫表皮碳氢化合物（Cuticular hydrocarbon）
豌豆蚜CHC 的提取：单头无翅成虫转移至2mL色谱瓶，首先加入200 ng正二十四烷(4ng/uL)作为内标，然后用玻璃吸头加入200uL正已烷，轻轻摇动2min，用玻璃巴斯德管吸取正已烷提取物至新的色谱瓶。重复上述洗涤步骤两次(不加内标)，将三次提取物合并(约600uL)，高纯氮气浓缩至200-300uL。
CHC的纯化:将上述浓缩的正已烷提取物转移至装有~300mg硅胶 (70-230mesh)的玻璃巴斯德管小柱。用2mL正已烷洗脱碳氢化合物，氮气温和吹干，最后复溶在 50uL 正己烷，进行色谱分析。
需要注意的是，CHC的提取全程要注意避免塑料容器和吸头的使用以防止污染。使用玻璃瓶和玻璃吸头。
配套的试剂耗材：
收纳盒装 2mL色谱瓶+顶空盖垫 100个/套
正二十四烷 99% 25g
玻璃滤芯吸头 100根/盒
玻璃巴斯德管小柱（硅胶，70-230目，300mg） 100根/盒
硅胶胶头 5个/包
豌豆蚜CHC 的提取：单头无翅成虫转移至2mL色谱瓶，首先加入200 ng正二十四烷(4ng/uL)作为内标，然后用玻璃吸头加入200uL正已烷，轻轻摇动2min，用玻璃巴斯德管吸取正已烷提取物至新的色谱瓶。重复上述洗涤步骤两次(不加内标)，将三次提取物合并(约600uL)，高纯氮气浓缩至200-300uL。
CHC的纯化:将上述浓缩的正已烷提取物转移至装有~300mg硅胶 (70-230mesh)的玻璃巴斯德管小柱。用2mL正已烷洗脱碳氢化合物，氮气温和吹干，最后复溶在 50uL 正己烷，进行色谱分析。
需要注意的是，CHC的提取全程要注意避免塑料容器和吸头的使用以防止污染。使用玻璃瓶和玻璃吸头。
配套的试剂耗材：
收纳盒装 2mL色谱瓶+顶空盖垫 100个/套
正二十四烷 99% 25g
玻璃滤芯吸头 100根/盒
玻璃巴斯德管小柱（硅胶，70-230目，300mg） 100根/盒
硅胶胶头 5个/包
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